Mikro Teknikler | Taze Preparatları hazırlama şekilleri
Gelelim eğlenceli bir konuya...
Preparatların, mikroskopta incelenen nesneler olduğuna değindim. Bu preparatların ihtiyaç zamanına göre geçici veya uzun zaman dayanıklı olan kalıcı preparatlar olarak hazırlandıklarını da söyledim. Şimdi de geçici preparatların nasıl hazırlandıklarını inceleyelim.
Temel olarak üç farklı şekilde hazırlanırlar.
- Lam ve lamel arasında incelenmek için hazırlanırlar.
- Lam üzerinde frotis yöntemiyle hazırlanırlar.
- Boyama yöntemi ile hazırlanırlar.
LAM VE LAMEL ARASINDA İNCELEME
Lamın üzerine incelenecek nesne konur. Eğer incelenecek nesne küçük ise direkt lamın üzerine konur. Büyük ise kibrit çöpü büyülüğünde yardımcı bir nesne ile çevrelenir ve onun üzerine lamel kapatılır.
Mikroskopta incelenecek materyalin uzun süre saklanması gerekmiyorsa lam üzerine 1 2 damla su veya laktofenol çözeltisi damlatılırak inceleme ortamı hazırlanır.
KüÇüK BiR NoT: Klinik ve veteriner mikrobiyolojisinde 'mantar', diğer mikrobiyoloji dallarında 'küf' olarak ayrı ayrı adlandırılmasında karışıklık çıkmasın diye mikrofungus terimi üretilmiştir. Mikrofungusların incelenmesinde laktofenol kullanılması materyali çok daha iyi görünür kılar.
KüÇüK BiR NoT DaHa: Laktofenol kullanılan preparatlar 5-6 ay bozulmasan kalabilirler.
FROTİS YÖNTEMİ İLE İNCELEME
Yayma işlemi olarak Türkçeye çevirebiliriz.
Lamın ucuna incelenmek istenen sıvıdan bir damla damlatılır. 2. lamı alırız ve elimizi titretmeden
45 derece açı ile sıvıyı tek seferde 1. lamın üzerine dikkatlice süreriz.Bu işlemde neden lamel kullanılmıyor?
Çünkü lamelin hem ince hem de kolay kırılabilir yapısının olması işlemi olduğundan zorlaştıracaktır. Lamlar hem daha kalın daha sert ve yüzey alanı geniş olduğundan işimizi kolaylaştıracaktır.
BOYAMA YÖNTEMİ İLE İNCELEME
Bu yöntemde canlı organizmalara çeşitli maddeler enjekte edilir. Bu maddeler aslında canlılar için geliştirilen boyalardır. Böyle boyalara vital boyalar denir.
# Vital kelimesi canlı anlamına gelir. Vital boyalar da canlı boyalar demektir. Vital boyama incelemesi, sıvı bir ortamdaki hücrelere, doku parçalarından ayrılmış serbest hücrelere, saydam zarlara, hayvanların saydam bölgelerine veya opak organlara uygulanabilmektedir.
Bu boyama işlemi pH'a bağlı olarak gerçekleşir yani vital boyalar asidik ve bazik olarak ikiye ayrılırlar. Çalışma prensipleri de organellerin, hücrelerin bölümlerinin gösterdiği pH'a bağlıdır.
BAZİK VİTAL BOYALAR
> Metilen Mavisi (vakuol boyar)
> Tolvidin mavisi (vakuol boyar)
> Metilen yeşili (çekirdek boyar)
> Metilen azurin (vakuol boyar)
> Nil mavisi (vakuol boyar)
> Cresyl mavisi (vakuol boyar)
> Cresyl viole (mitokondri boyar)
> Nötr kırmızısı (vakuol boyar)
> Jaunus yeşili (mitokondri boyar)
➕ BAZI VİTAL BOYALARIN HAZIRLANMASI HAKKINDA
DA BİLGİ VERMEK İSTİYORUM:
- Metilen Mavisi:
Metilen mavisi = 1gr.
NaCl2 = 0,6gr.
Saf su = 100 mL
- Metilen Yeşili:
Metilen yeşili = 1 gr.
Alkol = %70 ile %99 mL arasında değişiklik gösterebilir.
%70'lik alkol materyali saklamak için kullanılır.
- Nötr Kırmızısı:
Nötr kırmızısı = 0,1gr.
İzotonik çözeltisi = 1000 mL
- Kongo Kırmızısı
Kongo kırmızı = 1gr.
Saf su = 1000 mL
Yorumlar
Yorum Gönder